一九九三年，她参与了吉林东北亚音乐台所举办的主持人大赛，凭借出色的表现一路过关斩将，最终在总决赛中脱颖而出，成功摘得冠军桂冠。自一九九四年起至一九九九年，她进入广州军区战士话剧团，成为一名专业的舞台演员。在这段军旅文艺生涯中，她始终严于律己、表现突出，曾三次荣获“优秀士兵”的荣誉称号，并先后四次获得部队的嘉奖表彰。一九九九年，她再度投身于大型赛事，报名参加了第七届《美在花城》广告新星大赛，经过多轮激烈角逐，最终成功晋级总决赛，展现了其在表演与舞台领域的持续潜力与多元才华。
二零零零年，他迎来了个人演艺生涯的开端，在由周杰、任泉、释小龙联袂主演的古装悬疑剧《少年包青天第一部》中饰演阮文浩一角，这不仅是他的首部电视剧作品，也标志着他正式踏入演艺圈；同年，他又与李解、郑天玮合作，主演了古装剧《宝帖传奇》（该剧亦被称为《稀世宝贴》），并在剧中成功塑造了乾隆皇帝的形象。到了二零零四年，他在胡军、剧雪、鄂布斯主演的古装历史剧《朱元璋》中亮相，饰演了朱元璋的太子朱标这一重要角色。二零零六年，他参演了由翟俊杰执导的电影《我的长征》，于片中饰演了深受人民爱戴的周恩来总理。二零零七年，他与许亚军、潘宏梁、张檬共同主演了抗战题材电视剧《远东第一监狱》，在剧中扮演了赵新民；同年，他还与张檬、金丽丽、斯琴高娃合作，主演了古装励志剧《杂技皇后夏菊花》，并担纲男主角，出演了丁一民这一角色。二零零八年，他携手王亚楠、郭金、杜雨露，主演了红色战争爱情剧《红星1935》（该剧原名为《杀出绝地》），在剧中饰演了红军小分队队长赵子俊；同年，他还在田少军、郑卫莉、汪洋主演的抗战剧《铁肩担道义》（又名《李大钊》）中出演，再次饰演了周恩来，这也是他继电影《我的长征》之后第二次塑造周恩来总理的形象；同年，他还与颜丹晨、于震、荆浩合作，主演了年代传奇剧《女人树》，在剧中饰演了梁不为这一人物。
二零零九年，这位演员与侯勇、王志飞、高圆圆等共同出演了长篇历史史诗剧《大秦帝国之裂变》，他在剧中塑造了秦国大将军车英的形象，这一角色被塑造为商鞅变法过程中最为关键的推动力量之一。同年，在作品《大秦帝国之裂变》中，他同样诠释了军车英这一人物。二零一零年，他参演了由吴兆珊执导的乡村情感剧《沸腾的村庄》，并担纲男主角，饰演村主任赵国安；也在同一年，他出演了由张翰、魏晨主演的青春偶像剧《一起又看流星雨》，在剧中扮演艾利斯顿学院传奇般的第一代考神林晓黎。二零一一年，他与刘之冰、王晖、徐箭合作，主演了电影《忠诚与背叛》（该片亦被称为《铸剑·1927》），在片中饰演周恩来同志；同样是这一年，他还在抗战题材剧集《战地黄花》中再次出演周恩来；此外，他与张延、汤镇宗、马崇乐共同主演了商战情感剧《大典当》，在剧中担任男一号卢源。二零一三年，他与王霙、温峥嵘合作，主演了抗战情感剧《领袖》，在剧中扮演革命家张闻天，这也是他继《错爱》之后第二次与演员温峥嵘进行合作。二零一六年六月二十三日，由他与黄海冰、严屹宽、叶璇主演的抗战剧《东方战场》正式播出，他在剧中再度饰演周恩来。在随后的多部作品中，包括《东方战场》、《东方战场》（剧中位置为右）、《东方战场》、《东方战场》、《东方战场》（剧中位置为左）、《东方战场》、《东方战场》、《东方战场》、《东方战场》、《东方战场》（剧中位置为左）以及《东方战场》，他都多次塑造了周恩来同志的艺术形象。二零一六年，他还与黄海冰、远明、刘涛合作主演了革命历史剧《红星照耀中国》，在剧中饰演周恩来；同年，又与刘之冰、游大庆、王辉合作主演了抗战历史剧《彝海结盟》，再度出演周恩来一角。在作品《彝海结盟》中，他同样饰演了周恩来。二零一六年五月，他参与了电影《大会师》的拍摄，在片中饰演周恩来。此外，在《大会师》（剧中位置为中）、《大会师》（剧中位置为左）、《大会师》、《大会师》（剧中位置为中）、《大会师》（剧中位置为中）、《大会师》（剧中位置为中）、《大会师》、《大会师》（剧中位置为左二）、《大会师》（剧中位置为右）、《大会师》（剧中位置为右二）以及《大会师》等多部影视作品中，他都持续地塑造了周恩来同志的不同侧面。二零一七年一月，他参加了仙侠玄幻剧《古剑奇谭2》的拍摄，在剧中饰演闻人羽的师父程廷钧。同年五月，他与黄海冰联袂主演了革命历史剧《西柏坡的回声》，再次出演一代伟人周恩来。二零一八年，他主演了重大革命历史题材电视剧《外交风云》，在剧中出演“将军大使”黄镇；同年，他还出演了玄幻电视剧《临界天下》，在剧中饰演祖丁皇帝这一角色。
二零一八年十月十四日，演员侯祥玲凭借其出色的表演实力，成功入围第十二届中国金鹰电视艺术节暨第二十九届中国电视金鹰奖，并荣获优秀男演员提名。次年九月十九日，他主演了一部聚焦历史与外交题材的电视剧《外交风云》，该剧的播出进一步展现了他在正剧领域的扎实功底。进入二零二零年，其演艺活动更为活跃：一月二十一日，参演了由田镇执导的作品《幸福敲了两次门》，在剧中他生动塑造了姚远这一角色；同年十二月二十七日，另一部由他参演的战争题材剧集《跨过鸭绿江》于中央电视台综合频道播出，他在剧中饰演了角色柴成文。在系列作品《幸福敲了两次门》、《幸福敲了两次门》、《幸福敲了两次门》、《幸福敲了两次门》及《幸福敲了两次门》中，他均以不同侧面诠释了姚远这一人物，呈现出丰富的角色层次。 二零二一年四月十八日，侯祥玲参演的电视剧《绝密使命》与观众见面，他在剧中扮演了一位颇具韵味的上海爷叔。同年，他还在电影《毛泽东在才溪》中挑战了周恩来总理这一重要历史人物，其塑造获得了广泛关注。十二月七日，由他领衔主演的电影《有风吹过》正式开机；此外，他也参与了电视剧《理想照耀中国》的拍摄工作。 二零二二年，他的艺术活动延伸至舞台，参与了《永远跟党走 奋进新征程》，并倾情演唱了《百年风流》。同年十一月十二日，作为首届“大戏看北京”展演季的重点推介剧目，革命历史题材话剧《万水朝东》正式公布了演职人员名单，侯祥玲的名字位列其中。 二零二三年十二月十八日，他参演的电视剧《鲲鹏击浪》如期播出；紧接着在十二月二十八日，其参演的电影《绝地重生》于北京举行了隆重的首映礼。 步入二零二四年，其作品持续推出：八月二十三日，参演的电视剧《走向大西南》播出；九月十二日，另一部参演的电视剧《曙光》顺利杀青；十一月五日，电视剧《西北岁月》播出，他在剧中再次饰演了周恩来同志。展望二零二五年，由张建栋执导、侯祥玲主演的电视剧《守候明天》也将与观众见面，令人期待。
2021年12月29日，经相关程序选举通过，该人士正式当选为中国电视艺术家协会第三届演员工作委员会的委员之一。此次当选不仅体现了业界对其专业能力与行业贡献的广泛认可，也标志着其将在协会的组织框架内，与其他委员共同参与并推动演员行业的相关工作与建设。