二零一七年一月十六日，她首次亮相荧屏，参演了由庄濠全、赵奕欢、陈柏融、叶子淇等共同主演的奇幻爱情剧《校花前传之很纯很暧昧》，这部作品标志着其个人演艺生涯的正式开启。到了二零一八年九月二十一日，由导演落落执导的青春校园题材电影《悲伤逆流成河》在全国公映，她在片中生动塑造了名为“谷丹”的角色。次年，即二零一九年二月十一日，一部集结了陈乔恩、陈晓、戚迹、海陆等众多演员的古装励志剧《独孤皇后》开始播出，她在剧中扮演了女主角独孤伽罗的挚友南枝，展现了角色间的深厚情谊。二零二零年十月十七日，她与宋伊人、邓超元、洪杉杉、王润泽等合作出演的青春校园剧《我凭本事单身》于优酷视频平台上线；紧接着在同年十二月二十四日，另一部由她与龚俊、郑湫泓、方逸伦、余凯宁等人联袂主演的古装爱情剧《绝世千金完结篇》也在优酷播出，她所饰演的盛京公主钟子云性格活泼可爱，给观众留下了深刻印象。进入二零二一年，七月一日，为献礼中国共产党成立一百周年而制作的历史题材影片《1921》上映，她在片中诠释了一位追求进步的工人形象；八月二日，其参演的校园青春剧《上游》于优酷播出，她饰演了大学生乐队的主唱徐梦璐；同月二十七日，由朱丽岚、黄天崎、孔奇力等人与她共同主演的古装轻喜剧《逢君正当时》在腾讯视频上线，她在剧中出演了聪明能干、忠心耿耿的贴身丫鬟李巧儿。时间来到二零二二年二月二十八日，一部由曹煜辰、田曦薇、肖宇梁、金尤美等联合主演的古装轻喜剧《姻缘大人请留步》正式播出，她在剧中成功刻画了谭玉婉这一角色，细腻地表现了一位在面对爱情与婚姻时内心充满犹豫、患有婚前恐惧症的年轻女子的复杂心理。
二零一五年，林芷伊顺利通过考试，进入上海视觉艺术学院表演艺术学院，就读于表演专业下设的音乐剧表演方向。在校期间，她专注于专业学习与舞台实践，积累了丰富的表演经验。出于对学业的深入追求与个人发展规划，她于二零一九年主动申请延长学习年限两年，并因此被正式编入二零一七级学生序列继续深造。此外，她还积极参与学院的艺术实践活动，曾在一九年表演专业音乐剧方向的毕业作品中登台演出，参演了当年的毕业作品《吉屋出租》。
在电视剧《姻缘大人请留步》中，演员林芷伊成功塑造了谭玉婉这一角色，生动展现了一位对爱情与婚姻充满困惑、在抉择面前徘徊不前的婚前恐惧症患者形象。尽管这是她首次尝试此类具有复杂心理状态的角色，但林芷伊凭借精湛而细腻的演技，将“恐婚患者”的内心挣扎与情感波动演绎得淋漓尽致，赢得了整个剧组的高度评价与一致认可。此前，她因参演网剧《我凭本事单身》而逐渐被广大观众所熟知，近年来更持续带来了多部令人印象深刻的优秀作品，展现出可塑性强且不断进步的表演实力，让人对她未来的艺术发展抱有更多期待。在公开的写真中，林芷伊洋溢着青春的朝气与光彩，她身着白色校服与黑色百褶裙，造型简约而清新，在恬静微笑的同时，举止间又流露出自然活泼的可爱气息；而在日常生活里，她同样保持着那份真实动人的灵动与亲和力。