刘真佑自幼便展现出过人的艺术天分，在中学求学阶段，他就已经频繁活跃于各类舞台，积累了丰富的表演经验。1994年，他应一位友人的邀请，加入了北京游乐园的演出团队，专门从事现场短剧的表演工作；在那段为期约半年的时光里，他进一步打磨了自己的舞台技艺与临场表现力，随后才选择离开，继续追寻更广阔的艺术道路。刘真佑的人物照片也记录下了他在不同时期的神采与风貌。
一九九八年，刘真佑参与了由孙树培执导、琼瑶担任编剧的爱情喜剧电视剧《还珠格格》的拍摄工作；同年，他还参演了由黄健中执导，李诚儒、王茜、郑晓宁等共同主演的电视剧《警坛风云》。进入二零零一年，他在张黎执导、盛和煜编剧，王冰与吕中主演的历史题材电视剧《走向共和》中饰演了端方一角。此后，他陆续在《保镖》、《上官婉儿》、《黑血》、《延安颂》、《最后的骑兵》、《南少林》、《中华之剑》、《生死搭档》等多部作品中亮相，塑造了众多戏份不一、性格各异的角色。二零零六年，他参演了冯小刚执导的电影《集结号》，在片中扮演一位愤青干部，其生动的演技获得了观众与评论界的认可。次年，他主演了吴祖云导演的剧情片《太阳花开》，成功诠释了高建桥这一人物。二零零八年，他与陈建斌、于和伟、倪大红等演员合作，在高希希执导的古装历史战争剧《三国》中出演司马昭一角。二零零九年，他在张翼平执导的电影《永州故事》中担任主演，饰演了盘存礼这个角色。在这之后，他又相继出演了《金都一九四三》、《被雨淋湿的翅膀》、《蓝裙子》、《我在马路边捡到一元钱》、《杨成武强攻东团堡》、《血战陈庄》以及电视剧《孔雀翎》、《米脂婆姨》等作品。二零一三年，他出演了由张孝正执导，胡杏儿、李晟、邱泽主演的电视剧《红酒俏佳人》，在剧中饰演施震。二零一四年，他在刘二威执导，陈乔恩、张译、蔡明主演的都市题材电视剧《嫁个老公过日子》中扮演阮总。二零一五年，他参演了麦贯之执导，陈键锋、杜若溪主演的年代悬疑剧《同谋者》，饰演宋凯文一角。二零一八年，他出演了钟澍佳执导，窦骁、古力娜扎主演的都市职场剧《十年三月三十日》，演绎了一位霸气干练的文总；同年，他还在李子俊执导，大鹏、林家栋领衔主演的电影《第八个嫌疑人》中饰演了张文海。也是在这一年，他与侯明昊合作，主演了由钟澍佳执导的电视剧《倩女幽魂》，饰演厉竞天。二零二零年十一月七日，他参演的由优酷出品的都市女性情感励志剧《致勇敢的你》在西安正式开机。同年，他出演了钟澍佳执导，窦骁、陈都灵、胡军主演的年代情感剧《良辰好景知几何》，扮演莫希白；并参演了国建勇执导，王千源、蓝盈莹、严屹宽主演的涉案剧《宣判》，饰演卓建设。二零二二年，其出演的电视剧《致勇敢的你》于七月八日播出，另一部电视剧《良辰好景知几何》则于四月三十日与观众见面。至二零二四年七月三十一日，他又有新作电视剧《私藏浪漫》播出。
二零零八年，演员刘真佑在大型古装历史剧《三国》中成功塑造了司马昭这一重要角色。他的表演风格既松弛自然又充满内在的爆发力，这得益于他多年来在演艺事业上的持续耕耘与不懈积累。随着经验的沉淀，镜头前的刘真佑不仅展现出愈发沉稳的气质，其对角色的驾驭也显得更为纯熟与深刻，整体表演透露出一种经过时间打磨后的成熟魅力。