马丽自幼便显露出对表演艺术的浓厚兴趣与过人天赋，在继父的持续鼓励与支持下，她坚定地选择了以表演为职业发展方向。自1996年起至1999年，马丽先后进入辽宁文化艺术学校以及辽宁文化艺术职工大学表演系进行系统学习，为她的演艺生涯奠定了初步基础。随后在2001年，她凭借优异成绩考入中国戏剧教育的最高学府——中央戏剧学院表演系，接受了更为深入和专业的训练。2004年从中戏毕业后，马丽并未停止进修的脚步，她选择进入北京大学戏剧研究所下设的林兆华戏剧研修班继续深造，进一步丰富了自己的戏剧理论素养与实践能力。
早在2003年，当时仍在求学的马丽便已登上话剧舞台，她参演了由中央戏剧学院女导演姬沛执导的作品《安妮日记》，并在其中扮演了名为密普的角色，由此开启了她的表演生涯。到了2005年，她的舞台履历进一步丰富，先是参与了由饶晓志执导并首次公开演出的剧目《我贵姓？》；同年，她又出演了戴鹏飞执导的首部幽默情景话剧《自我感觉良好》，成功塑造了剧中人物贾美女。也正是在这一年，马丽在一部搞笑贺岁舞台剧《满城全是金字塔》中饰演了一位考古学家，其出色的表演吸引了台下观演的开心麻花导演彭大魔的注意，彭大魔随即邀请她在话剧《疯狂的石头》中客串一个模仿杨二车娜姆的小角色；这次合作成为重要契机，不久之后，马丽便正式加入了开心麻花舞台戏剧团队，成为其中一员。在作品《安妮日记》中她饰演密普，而在《自我感觉良好》中则饰演贾美女。2006年8月25日，由易卜生创作的话剧《建筑大师》正式上演，马丽与著名演员濮存昕、陶虹共同担任主演，该剧作为第二届中国国家话剧院国际戏剧季“永远的易卜生”的开幕大戏，受到了业界与观众的广泛关注。2007年，马丽与闫非、彭大魔两位导演进行了第一次正式的喜剧合作，出演作品《谁都不许笑》并担任女二号，凭借此次演出，她在开心麻花团队中奠定了稳固的地位。此后，她参演的多部话剧如《满城就这一棵树》、《暗恋紫竹园》、《倒霉阿翔》、《甜咸配》等也陆续与观众见面。2009年，她与包贝尔联袂主演了舞台剧《江湖学院》，在剧中生动演绎了拜金女“庄纯”一角，该剧自首演以来便广受观众喜爱与追捧，更被媒体誉为“年度最受追捧的舞台剧”。2010年，马丽与沈腾首次在话剧《乌龙山伯爵》中携手合作，这次合作极为成功，使二人自此成为舞台上默契无间的黄金搭档。2012年11月28日，开心麻花推出的贺岁新剧《夏洛特烦恼》成功演出，马丽参与了该剧的表演，这部剧讲述了一个普通人穿越回高中校园并实现种种梦想的奇妙故事。2018年1月20日，“百花迎春——中国文学艺术界2018春节大联欢”在北京国家会议中心一号展览馆隆重举行，马丽受邀担任了此次活动的现场主持嘉宾。
2010年，马丽与何炅在湖南卫视元宵喜乐会上携手表演了小品《超幸福鞋垫》，其精彩的演绎赢得了广大观众与网友的普遍喜爱和推崇；此后自2011年至2013年，她连续三年与何炅合作推出“超幸福鞋垫”系列小品，这一节目因其独特的喜剧风格和高人气，一度成为湖南卫视元宵喜乐会上备受期待的固定环节。2013年，马丽首次登上中央电视台春节联欢晚会的舞台，与沈腾合作出演了小品《今天的幸福2》，并在此次演出中第一次以“马冬梅”这一深入人心的形象亮相全国荧幕，给观众留下了深刻印象。2014年，马丽第二次登上春晚舞台，再次与沈腾合作表演了小品《扶不扶》，该作品紧扣社会现实，生动反映了“扶不扶老人”这一热点话题，在播出后引发了广大网友的广泛讨论与深思，并最终收获了当年春晚最受欢迎语言类节目第一名的佳绩。2015年，马丽与沈腾搭档参加了东方卫视推出的喜剧竞赛真人秀节目《欢乐喜剧人》，两人凭借出色的喜剧功底和默契配合一路过关斩将，成功杀入总决赛，并最终凭借舞台版作品《行尸走肉》的精彩表现荣获冠军头衔。在2015年至2024年这段时期内，马丽又先后六次登上中央电视台春节联欢晚会，陆续出演了小品《投其所好》、《占位子》、《走过场》、《还不还》、《坑》以及《寒舍不寒》，持续为全国观众带来欢笑与感动。
二零零九年，凭借在话剧舞台上的卓越表现被誉为“话剧女皇”的马丽，获得了电影公司的青睐，由此正式开启了她的银幕生涯。次年，她参演的首部电影作品《决战刹马镇》公映，她在片中彻底颠覆了以往的舞台形象，饰演了一位造型夸张、性格泼辣的“饼嫂”，这一突破性尝试给观众留下了深刻印象。二零一四年，开心麻花团队筹划将经典话剧搬上大银幕，拍摄电影版《夏洛特烦恼》。在项目初期，出于市场票房风险的考量，剧组曾倾向于选择外形更为靓丽的女演员，然而在试镜过程中，马丽在话剧舞台上所塑造的“马冬梅”形象始终萦绕在导演心头，其鲜活独特的生命力令人难以割舍。最终，导演改变了最初的想法，力排众议确定由马丽担纲影片女主角。这部电影上映后取得了空前成功，以年度黑马之姿斩获了十四点六亿元的票房佳绩。二零一七年六月，马丽作为常驻嘉宾加入了东方卫视推出的明星旅行体验类综艺节目《旅途的花样》。同年九月三十日，她与艾伦、沈腾联袂主演的喜剧电影《羞羞的铁拳》登陆全国院线，她在片中精彩演绎了与男拳手意外互换灵魂的体育记者马小，影片票房最终突破二十二亿元大关。凭借此片，马丽成功跻身“双十亿票房女主角”的行列，并因对“马小”一角的出色诠释，荣获第九届国际华语电影节金龙奖最佳女演员奖。同年十一月，她受聘担任第四届丝绸之路国际电影节的“宣传大使”；十二月二十八日，在腾讯白皮书年度盛典上，马丽被授予“年度电影之星”的荣誉称号。 马丽的艺术道路始终伴随着对自我的不断突破与对多元角色的勇敢挑战。在二零一七年至二零二二年期间，她曾两度参演“我和我的祖国”系列献礼影片，分别是《我和我的家乡》和《我和我的父辈》。然而，这一阶段她对于电影项目的选择也一度引发观众讨论，其市场认可度经历了起伏。从豆瓣评分仅为四点四分的《喵星人》，到评分三点八分的《阳光劫匪》，再到仅收获三点五分的《东北往事之破马张飞》，部分作品的口碑不尽如人意。她更因在电影《李茂扮太子》和《测谎人》中的表现，两次被列入“金扫帚奖最令人失望女演员”的提名名单。演艺生涯的转折出现在二零二二年，随着她主演的《这个杀手不太冷静》和《独行月球》相继上映，其精湛演技重新赢得了观众与市场的广泛信心。特别是在电影《这个杀手不太冷静》中，她塑造的女明星“米兰”一角深入人心，凭借这一角色，她成功入围第三十三届华鼎奖中国电影满意度调查最佳女主角，并一举夺得第十七届中国长春电影节金鹿奖最佳女演员奖以及第三十五届东京国际电影节中国电影周金鹤奖最受欢迎女演员奖。二零二二年三月三日，该片累计票房突破二十五亿元；同年八月二十六日，电影《独行月球》票房突破二十八亿元，至此，马丽主演电影的总票房累计突破一百五十亿元，她成为中国电影市场上首位主演票房超过百亿的女演员。 二零二三年一月，她参演了微电影《我和我的春晚》；四月二十八日，其参演的电影《人生路不熟》上映，她在片中饰演女主角的母亲霍梅梅；五月二十日，她出演的爱情喜剧电影《请别相信她》与观众见面；八月十六日，她参与录制的综艺节目《童话》于优酷视频播出；九月十日，她参加的综艺节目《现在就出发第一季》也如期播出。此外，她还陆续参与了多档综艺节目的录制，包括《童话》、《你好星期六》、《你好星期六》、《你好星期六》、《你好星期六》、《你好星期六》、《你好星期六》以及《你好星期六》。二零二四年一月十三日，马丽在二零二三微博之夜上获封“微博年度优秀演员”；二月十日，她参演的电影《第二十条》和《热辣滚烫》同日上映；二月十六日十四时二十五分，马丽主演电影累计票房达到一百八十一亿元，成为首位达成此成就的女演员；三月四日十四时，其主演电影总票房突破一百九十三点一六亿元，位列中国影史影人主演电影票房榜第五名。三月二十八日，她受邀担任第十四届北京国际电影节“天坛奖”国际评奖委员会委员；四月十二日，在二零二三至二零二四年度中国电影大数据暨电影频道M榜荣誉之夜上，马丽荣获“年度女演员”称号。六月十六日，她参加了《微博电影之夜》。七月十六日，她主演的电影《抓娃娃》在全国上映，她在片中饰演春兰一角；同日，其主演电影累计票房正式突破二百亿元大关，使她成为中国影史首位票房破二百亿的女演员。八月三日，据猫眼专业版数据显示，当时正在热映的、由马丽主演的电影《抓娃娃》票房已超过二十五亿元，推动马丽主演电影累计票房升至二百二十点五九亿元，在中国影史影人主演电影票房榜上的排名上升至第四位。九月十五日，她特邀出演的电影《一雪前耻》上映。十月十五日，她参加了新华社的节目《十年·拾光》，与老中青三代文艺工作者共同探讨“深入生活、扎根人民”的创作理念。 二零二五年，她主演的电影《英雄出少年》上映；一月二十八日，她参加了《2025年中央广播电视总台春节联欢晚会》，与众星一同合唱歌曲《妥妥的》，并携手老搭档沈腾表演了小品《金龟婿》；四月二十三日，她参演的电影《好好的》上映；四月三十日，她主演的电影《水饺皇后》上映。截至当年四月底，马丽主演的电影总票房已达到二百二十八点九亿元，在中国女演员中呈现出断层式的领先优势。五月一日，由她主演的女性励志题材电影《水饺皇后》上映首日便夺得票房冠军。六月十四日，她参演的综艺节目《麻花特开心》播出。六月十九日，她参演的电影《醉吴歌》全国公映。七月十八日，她参演的电影《你行！你上！》上映。同年十一月，她凭借在电影《水饺皇后》中的精湛表演，荣获第二十一届中美电影节年度最佳女主角奖；十一月七日，她与成龙、陈祉希、金晨等共同合唱的中国电影一百二十周年致敬曲《永不落幕的星辰》正式上线发布。 二零二六年一月十七日，中央广播电视总台春节联欢晚会进行第一次联排，马丽确认将参与语言类节目的演出。二月十日，她凭借在作品《水饺皇后》中的出色表现，获得第四十四届香港电影金像奖最佳女主角提名。二月十七日，她参演的电影《《熊猫计划之部落奇遇记》上映。二零二六年五月一日，她主演的电影《千金不换》上映。二零二七年二月六日，她参演的电影《流浪地球3》上映。
2014年11月，马丽在四川参与录制《囍从天降》节目期间，因环境适应问题出现了明显的高原缺氧反应，幸得现场医护人员及时介入与救助，其身体状况随后逐渐好转，最终化险为夷。2016年6月28日，马丽在航班飞行过程中突感不适，被机上急救人员用担架抬下并送往医院，不得不在医疗监护中度过自己的生日。2021年4月10日，马丽在接受中央电视台专访时，坦然公开自己曾持续一年与抑郁症抗争的经历。2025年1月29日，马丽亮相央视春节联欢晚会后，多位业内观察者发文提及她的甲状腺部位略显肿大，引发公众关注。此后，有粉丝指出马丽早年曾就相关健康问题作出回应，她本人确实在互动中向粉丝说明自己患有甲状腺结节，但强调情况稳定、并无大碍。在个人感情方面，2017年1月，马丽与演员许文赫正式公开恋情。2018年4月11日，马丽于朋友圈分享照片，宣布与许文赫登记结婚；许文赫亦同步在微博平台公布了这一喜讯。2019年12月1日，马丽通过微博账号正式公布了怀孕的消息。2025年4月，马丽在一次访谈中透露，因童年时期父母离异，她曾长期遭受同学霸凌并深陷自卑情绪长达三十余年，直至成为母亲后，她才逐渐找回自信，并表示如今愿意为孩子付出一切。
自2016年起，马丽持续投身于各类公益事业与社会活动，积极承担公众人物的社会责任。2016年，她曾作为《生命缘》第四季首期的公益助力嘉宾，亲自前往病房探望，为粉丝送去温暖与欢笑。2017年12月5日国际志愿者日，马丽正式加入中国文艺志愿者协会，成为新文艺工作者群体中的一员。进入2018年，她的公益参与更为广泛：4月8日，由阿里文学与中国社会福利基金会共同发起的全民阅读公益活动——“益”起读书正式启动，马丽担任该活动的公益阅读大使，其宣传海报陆续登陆全国多地地铁、公交车等公共空间；4月20日，她被任命为国家卫生健康委员会关爱儿童预防接种宣传大使；同年10月19日，她还出席了由凤凰网主办、中华少年儿童慈善救助基金会协办的“美丽童行”公益盛典。2019年，马丽在公益与国际交流领域均有建树：她先是被欧洲旅游委员会官方宣布担任中欧旅游年欧盟旅游交流大使；随后，在第24个世界防治结核病日来临之际，她受邀参加2019年世界防治结核病日主题宣传活动，并在现场被授予红丝带健康大使和全国结核病防治宣传大使的称号；同年6月，她应中国儿童少年基金会之邀，出任“春蕾计划”爱心大使。2021年7月，河南遭遇特大暴雨灾害，马丽慷慨解囊，向灾区捐款100万元人民币。时间来到2024年，她在12月15日受聘担任丹东文旅推广大使。2025年，马丽的活动更为密集：1月15日，开心麻花与法国普德赋举行文化签约仪式，她在现场表达期待，希望未来能与沈腾一同在法国进行演出；3月12日，她被聘任为职业健康宣传大使；4月21日，她现身武汉，连续参加多场电影《水饺皇后》的观众见面活动，期间回应“中国票房最高女演员”称号时，她谦逊表示这“只是一个数字，只能说明我拍的戏比较多，可能观众比较喜欢看”；8月29日，她受邀担任海浪荣誉评审；至11月29日，马丽再度展现爱心，通过中华社会救助基金会向香港捐款100万元。
毕业于中央戏剧学院的马丽，其演艺履历中不乏令人瞩目的表现，她曾参演《决战刹马镇》、《爱情维修站》等多部影视作品，并凭借扎实的演技获得了观众的认可。然而，相较于这些严肃题材的正剧角色，真正让她在广大观众心中留下深刻烙印的，却是她在喜剧领域所绽放的独特光彩。马丽无疑是文艺表演领域不可多得的才华型演员，她不仅拥有与生俱来的出色天赋和机敏灵动的临场应变能力，其敬业精神与对表演的专注也为人称道，她注重形体管理，保持着纤秾合度的健康体态。自2004年踏入行业以来，马丽在话剧舞台上倾注了大量心血，演出累计已超过千场，积累了极为深厚的舞台功底。她首次登上中央电视台春节联欢晚会的舞台，便是凭借精彩的小品作品《今天的幸福2》，此后更与何炅在湖南卫视元宵喜乐会上合作，成功演绎了广受欢迎的“幸福鞋垫”系列小品，进一步奠定了她的喜剧形象。但马丽的艺术身份远不止于小品演员，她更是开心麻花团队中不可或缺的舞台剧核心人物，被许多剧迷誉为“舞台剧女王”。除了上千场的话剧演出，她也在数十部电视剧中塑造了性格各异的角色，展现了其宽广的戏路。在农历马年春晚的小品《扶不扶》中，她为了贴合剧中老太太的角色，不惜主动增肥，其颠覆性的造型和精湛的演绎给全国观众带来了惊喜，令人眼前一亮。作为开心麻花的当家花旦，马丽始终脚踏实地，在舞台上一丝不苟地打磨每一个角色，塑造出一个又一个鲜活生动、令人捧腹又感动的喜剧形象。甚至有评论认为，马丽已经形成了独具个人特色的表演风格，结合其靓丽的外形与掌控舞台的十足气场，她完全称得上是当今喜剧界一位当之无愧的“新晋喜剧女神”。
在2025年5月3日这一天，演员马丽为了宣传其主演的电影《水饺皇后》而奔波于路演活动之中。当行程抵达长沙站时，她在与现场观众进行亲切互动的环节里，情绪骤然难以自持，当场潸然泪下。她哽咽着向众人透露，自己和丈夫，以及好友沈腾与他的太太，这两个家庭在长达十年的时间里持续遭受着网络暴力的困扰与伤害。这种无休止的恶意攻击甚至严重影响了他们的日常生活，导致她和沈腾都因为顾虑而不敢与各自的家人一同在公开场合露面或出游。马丽进一步解释道，这种大规模的负面舆论和针对性骚扰，大致是从电影《夏洛特烦恼》上映的那个时期开始涌现的。自此之后，便有数量众多、行为异常的“特殊人群”不断出现，他们的一系列言行不仅针对演员本人，更蔓延开来，切实地伤害到了沈腾的家人和她自己的家庭成员。次日，也就是5月4日，马丽继续出席了电影《水饺皇后》在上海举行的路演活动。现场有一位忠实粉丝在发言中诚恳地表示，希望那些不友善的言论和攻击不要影响到马丽与沈腾之间宝贵的艺术合作。对此，马丽给予了明确而坚定的回应，她郑重承诺绝不会因此与沈腾终止合作，并动情地说道：“不会的，他是我演艺生涯中的恩人，也是我人生里非常重要的贵人，请大家放心。”