王二妮于一九八五年出生于陕西省榆林市榆阳区大河塔乡冯家湾村，自幼便展现出对艺术的浓厚兴趣。一九九七年，她顺利进入榆林市百花艺术学校，在校期间系统学习了两年戏曲舞蹈专业，为日后的演艺生涯奠定了扎实的基础。一九九九年，刚刚组建不久的安塞县艺术团前往榆林招募演艺人才，王二妮凭借其出色的天赋和潜力被选中，由此成为安塞县艺术团创立之初的第一批骨干成员。二零零一年初，她代表安塞县赴北京参加第一届农民歌手大赛，并以优异表现荣获第一名的好成绩。二零零五年除夕，她登上了延安通往北京的“红色专列”首届春节联欢晚会的舞台。次年，她先后参与了“陕西省第四届艺术节”以及纪念建党八十五周年的十大城市晚会演出。二零零七年，她参加了全国建党八十六周年暨党的十七大歌舞晚会。同年，她登上中央电视台《星光大道》节目的舞台，并成功闯入年度总决赛，由此正式宣布出道，开启了职业演艺道路。 二零零八年，她参与了中央电视台CCTV-7综艺节目《乡村大世界》的录制，并在节目中客串担任了第二现场主持人；同年九月二十六日，中央电视台模仿秀节目《梦想剧场》节目组更是破例为王二妮制作了个人专场演出。二零零九年，她为国庆献礼历史电视剧《东方红》演唱了片尾曲《山丹丹开花红艳艳》；同年九月，她还演唱了音乐人冯晓泉改编版的《东方红》试听版。二零一零年一月十二日，她推出了个人的第一张专辑《爱陕北》，这张专辑精心收录了包括《东方红》、《走西口》在内的十二首传统经典陕北民歌，通过融入新的音乐元素，既展现了陕北民歌悠远辽阔的艺术意境，也原汁原味地呈现了其原生态风格。二月十一日，她参加了第一届北京新春音乐会。二零一一年十月七日，CCTV-3音乐类季播节目《巅峰音乐汇》为王二妮开设了专场演出，这是她首次在中央电视台举办个人演唱会。同年，她还参演了民族歌剧《白毛女》，并在剧中成功塑造了喜儿这一角色。 二零一二年，她应邀参加了第二届中国孙思邈中医药文化节，并现场演唱了歌曲《山丹丹开花红艳艳》。同年十一月三十日，她前往北京昌平的一个山区农村，拍摄了歌曲《大辫子》的音乐录影带。二零一三年一月五日，王二妮正式加入北京歌剧舞剧院；一月十八日，她受邀参加了中组部举办的“茶话会”节目录制；九月十八日，她受邀在新加坡成功举办了“艺满中秋”个人首场音乐会；九月二十八日至二十九日，她参加了名家荟萃演出《京韵华彩》。二零一四年一月，她主演的剧情电影《哭恋》在中国大陆上映；在二零一四年央视马年春节联欢晚会上，她与歌手阿宝搭档，共同演唱了歌曲《张灯结彩》；七月二十一日，她携专辑首发单曲《故乡》参加了央视访谈节目《艺术人生》暑期特别节目——《时间都去哪儿了》的录制；十一月，她又参与了中央电视台三套《非常6+1》特别节目《非常星发布》的录制。 二零一五年一月，她推出了第二张个人专辑《我从西边来》，这张专辑的创作灵感来源于王二妮个人的真实经历；自七月五日起，她随《走进黄土地》文化采风团前往陕西进行采风，期间还拜访了著名作曲家赵季平；九月三日，她参加了在人民大会堂举行的《胜利与和平》大阅兵晚会；十月三十一日，她在澳门文化中心小剧院参演了第二十九届澳门国际音乐节《黄土谣》专场音乐会；十一月三日，她在香港新光戏院举办了“黄土地的诉说”王二妮民歌音乐会；十二月五日，她在北京人民大会堂成功举办了《黄土地的诉说》演唱会。二零一六年二月，她首次登上中央电视台“春节联欢晚会”的舞台，与贠恩凤、王向荣共同演唱了《山丹丹开花红艳艳》；六月十六日，她推出了个人单曲《三妮儿的笑》；九月十五日，她在西安大唐芙蓉园参加了中央电视台中秋晚会的录制；十月，她推出了另一首单曲《妈妈教我信天游》；十月一日，她参加了中央电视台《江山如画——2016国庆交响音乐会》的节目录制；十一月三十日，她作为民族歌唱家的代表，出席了在北京人民大会堂开幕的中国文学艺术界联合会第十次全国代表大会、中国作家协会第九次全国代表大会，并荣幸地成为中国文联第十届全国文联委员会委员中两位监票员之一，随后在文代会代表联欢晚会中，她与郭兰英、张也等同台献唱。 二零一七年一月十二日，她推出了两首单曲《吉祥中国年》和《过年的味道》；二月十一日，她登上中央电视台元宵晚会，与杜朋朋、正月十五组合、蜜蜂少女队等共同演唱了开场歌舞《正月十五闹花灯》；五月十一日，她推出了个人EP专辑《丰收中国》，这张专辑以原生态民乐为底蕴，融入了各种新颖独特的编曲，并巧妙运用了多种风格的民族音乐元素；六月，她作为特邀嘉宾助阵了《魅力中国城》红色魅力城市延安的竞演活动。九月三日，她参与了《中国戏歌》的录制，并演唱了《五哥放羊》；九月十五日，她参与拍摄并主演了红色主旋律电视剧《奔向延安》，在剧中饰演柳二妮一角；九月二十二日，她录制了央视综艺频道《巅峰音乐汇》王二妮个人专场音乐会；九月二十八日至十月十日，王二妮与王小妮随国务院侨办“文化中国”代表团访问美国，先后在波士顿、纽约、华盛顿、圣保罗、辛辛那提五个城市，为当地侨胞奉献了六场精彩演出；十月十五日，她随中国文联前往德国，参加了庆祝中德建交四十五周年的“莱茵华韵”文艺晚会；十一月一日，她再次推出两首单曲《在延安》和《荞麦花》。 二零一八年一月，她参加了“百花迎春”中国文学艺术界春节大联欢，并演唱了开场曲《恭贺新禧》。二月八日，她推出了贺岁单曲《新年到》。七月，她参加了中国文联文艺志愿服务团“送欢乐下基层”走进甘肃陇南武都区的慰问演出系列活动。十二月二十三日，她参加了“为人民歌唱——中国乐派声乐大师郭兰英艺术成就音乐会”，并演唱了歌曲《南泥湾》。同月，她还参加了“我们的四十年——庆祝改革开放40周年文艺晚会”，与杜朋朋、高保利共同演唱了歌曲《信天游》。二零一九年一月十七日，她再次参加了“百花迎春——中国文学艺术界春节大联欢”。一月二十五日，她参加了中央电视台新春走基层赴江苏省丹阳市的慰问演出活动，演唱了歌曲《桃花红杏花白》。二零二零年十月二十五日，她参加了中央广播电视总台重阳节特别节目《岁岁又重阳》。二零二一年七月一日，她参加的庆祝中国共产党成立100周年文艺演出《伟大征程》播出，她在节目中演唱了歌曲《小康之歌》。二零二二年二月二日，她参加了《百花迎春》晚会，并参与了中国音乐家协会的拜年环节。四月二十八日，陕西省第十七届运动会开幕倒计时一百天主题活动在榆林体育馆举行，王二妮作为该届运动会的形象大使首次公开亮相。五月二十三日，她参加了由中国文联主办的“与人民同行”——纪念毛泽东同志《在延安文艺座谈会上的讲话》发表八十周年特别节目。 二零二三年一月二十二日，她参加了《“百花迎春”——中国文学艺术界2023春节大联欢》，并与他人共同演唱了歌舞《陕北情》。同年一月二十一日，她参加了《2023年春节联欢晚会》；一月二十五日，她参加了《星光夜·幸福年2023星光嘉年华》；五月二十三日，她参加了《与人民同行——新时代文明实践文艺志愿服务特别节目》，并在节目中演唱了歌曲《到人民中去》。十一月三十日，她参加的《你好民歌》节目正式播出。二零二四年九月二十二日，她参加的二零二四年《中国农民丰收节晚会》播出，在节目中参与了联唱歌曲《丰收组曲》。二零二五年一月二十九日，她参加了《百花迎春——中国文学艺术界2025春节大联欢》，与刘大成、孔庆学、耿婕妤共同演唱了歌曲《张灯结彩》。八月二十七日，她参与的节目《烽火战歌》第二期《灯塔·红星照耀中国》在CCTV-1综合频道播出。十月十八日，她在节目《中国民歌盛典》中倾情演唱了《崖畔上开花》。
二零一四年九月，歌手王二妮与伴侣李飞正式步入婚姻殿堂，结为夫妻。时隔一年多，在二零一五年十二月三日的一次公开活动中，王二妮于《非常星发布》这一备受瞩目的舞台上，亲自向广大观众与媒体公布了两人早已结婚的喜讯，分享了这一私人生活的幸福时刻。与此同时，王二妮一系列风格鲜明的个人写真照片也在公众间流传，进一步展现了其舞台之外的形象与魅力。
王二妮女士在文化艺术领域担任了多项重要职务，她不仅是中国陕北民歌研究会的正式会员，同时也是陕西省音乐家协会的资深会员。在地方文艺团体中，她曾出任陕西省安塞县音乐舞蹈家协会的副主席兼秘书长，积极推动当地音乐与舞蹈事业的传承与发展。在参政议政方面，王二妮先后担任了陕西省延安市政协委员以及陕西省政协委员，以文艺工作者的身份为地方文化建设和社会发展建言献策。此外，她还曾作为陕西省的代表之一，出席了全国第十六次共青团代表大会。二零一五年六月十六日，于中国音乐家协会第八次全国代表大会的召开期间，经过大会选举程序，王二妮成功当选为中国音乐家协会理事，这进一步体现了她在音乐专业领域内所获得的广泛认可与崇高声望。
二零一五年二月一日，王二妮携手来自陕北的“红都组合”，共同登上中央电视台的公益音乐节目《梦想星搭档》，通过精彩的演出为听障儿童筹集公益资金超过五十四万元，这笔善款成功帮助六位听障儿童植入了人工耳蜗，为他们打开了聆听世界的大门；同年五月二十三日，王二妮与妹妹王小妮一同返回故乡延安，专程前往八一敬老院探望并慰问了在那里休养的老红军、老八路前辈们，为他们带去了温暖与关怀；七月十六日晚，王二妮积极参与了由百位明星共同发起的关注留守儿童“一带一路”万里行公益歌曲的录制工作，用歌声传递对留守儿童的关爱；九月二十一日，在陕西榆林市委、市政府的组织与主持下，“王二妮助学基金”成立新闻发布会在榆林市委会议室正式召开，王二妮在现场宣布该基金成立，并同时个人捐赠二十万元人民币，作为“王二妮助学基金”启动后的首笔专项善款，展现了其投身教育公益的坚定决心。 在社会活动方面，二零一六年八月二十二日，同样由陕西榆林市委、市政府牵头主办，“王二妮助学基金”捐赠仪式于榆林市委党校内隆重举行。王二妮再次捐出二十万元，作为该基金持续运作的重要支持，这笔捐款切实资助了三十五名刚刚考入大学的优秀寒门学子以及二十名成绩优异的中小学生，助力他们继续求学之路；次日，即八月二十三日，王二妮与妹妹王小妮又亲自前往大河塔乡，走访并慰问了家乡的留守老人与儿童，为他们送去生活物资与真挚的问候。二零一七年九月一日，“王二妮助学基金”在新一轮的助学活动中，将资助范围进一步扩大，共资助了七十名品学兼优的寒门学子，为他们减轻了经济负担。二零一八年六月十二日，王二妮因其良好的公众形象与持续的公益贡献，受邀正式担任“首都无偿献血宣传形象大使”，以此身份呼吁公众积极参与无偿献血这项崇高的公益事业。
王二妮的嗓音清澈而纯粹，仿佛未经雕琢的天然美玉，她那不加修饰的天籁之音中，深深蕴含着陕北地区淳朴而古拙的民风底蕴，传递着陕北原生态歌唱方式中最本真、最鲜活的生命力。在陕北当地，她被广大民众由衷地赞誉为“无冕之王”，这称号承载着乡亲们对她艺术造诣与人格魅力的高度认可。在《梦想星搭档》的舞台上，王二妮始终展现着从人民中走来的本色，质朴不仅是她艺术表达的根基，更是她人格中最鲜明的底色。她的音乐始终与人民的情感紧密相连，她为人民而歌，用那些源自民间、扎根生活的旋律真挚地回馈养育她的土地与人民。她深深植根于中华文化的丰厚土壤，让民族性成为其音乐创作与演绎中不可或缺的灵魂。通过独具个人特色的演唱方式，她生动诠释了充满“中国风”韵味的作品，从而深刻彰显出中华民族特有的艺术风采与浓郁的民族风格。