伍宇娟出生于一个普通的工人家庭，童年生活充满了各种艰辛与不易。1979年，她正式加入耒阳花鼓戏团，开始了自己的艺术生涯，并常年跟随戏团背着简单的行囊与被子辗转于各地进行演出。1981年，伍宇娟进一步进入当地的花鼓戏剧团担任专业演员，积累了丰富的舞台实践经验。直至1985年，她凭借出色的表现与天赋成功考入中央戏剧学院表演系，接受了更为系统与专业的表演训练。在校期间，她与同年入学的巩俐、史可、陈炜、金莉莉等同学因才华出众、表现亮眼而被并称为“中戏”当时名噪一时的“五朵金花”，共同成为校园内外备受瞩目的焦点人物。
一九八六年，青年演员伍宇娟首次登上大银幕，参演了其个人首部《难忘中学时光》。在这部作品中，她成功塑造了一位气质清新、性格可爱的女学生形象，其自然真挚的表演给观众留下了良好的初步印象。仅仅两年后，即一九八八年，伍宇娟迎来了其演艺生涯中的一个重要转折点。她在一部具有突破性意义的电影《疯狂的代价》中担纲主演，饰演了女主角青青。这部影片因其题材和表演上的大胆探索而在当时引起了全国范围的广泛关注与热烈讨论。凭借对“青青”一角的深刻理解和出色演绎，伍宇娟不仅赢得了业界与观众的认可，更一举获得了第十一届大众电影百花奖与第九届中国电影金鸡奖最佳女主角的重要提名，奠定了她在影坛的地位。此外，在另一部作品《难忘中学时光》中，她则挑战了艺术家的角色，展现了其作为演员的可塑性与多样性。值得一提的是，在《疯狂的代价》这部作品中，她再次饰演了名为青青的角色，进一步丰富了这一人物形象在不同故事背景下的艺术呈现。
一九九零年，她参演了由张丰毅担纲主演的电影《龙年警官》，在片中成功塑造了钟小妹这一角色，并凭借此片荣获第十四届大众电影百花奖最佳女配角奖，由此开启了演艺生涯的获奖历程。次年，即一九九一年，她出演了个人首部电视剧作品《雪山飞狐》，在剧中挑战自我，一人同时分饰袁紫衣与袁银姑两个性格迥异的角色，展现了其出色的演技可塑性。时间来到一九九二年，她与著名演员斯琴高娃合作，共同主演了影片《香魂女》，在其中饰演环环一角，这次合作进一步提升了她的行业知名度。一九九五年，由王志文、许晴领衔主演的电视剧《东边日出西边雨》正式播出，她在剧中饰演了主播陈丹妮，这一角色给观众留下了深刻的印象。综合来看，她在《龙年警官》中饰演了钟小妹，在《香魂女》中饰演了环环，在《雪山飞狐》中饰演了袁紫衣，并在《东边日出西边雨》中饰演了陈丹妮，这些角色串联起了她早期演艺事业的重要轨迹。
一九九七年，演员伍宇娟不仅亲自执笔创作了一部篇幅达四万字的中篇小说《山茶花开》，更以极大的热情与决心，自筹资金将其改编为电影，并同时肩负起编剧、导演与主演的多重职责。然而，由于在团队组建过程中用人出现失误，剧组自开拍以来便一直处于动荡不安的状态，加之当时又恰逢席卷亚洲的金融风暴，内外交困之下，拍摄工作举步维艰。经过一连串的波折与打击，剧组人员最终陆续离去，竟只剩下伍宇娟一人独自坚守。到了二零零一年，伍宇娟与著名导演谢晋携手合作，其参演的电影《女足9号》正式公映，她在片中成功塑造了罗甜这一角色。次年五月，她又与姜文、宁静等知名演员共同出演的电影《寻枪》登陆院线，她在其中饰演了韩小芸一角。二零零三年，伍宇娟将工作重心转向电视荧屏，参演了医疗题材剧集《没有硝烟的战场》，出演了以英雄护士叶欣为原型的医生角色。二零零四年，她在电视剧《红莓花儿开》中亮相，扮演了夏太平的妻子花月风，这是一个性格泼辣、情绪起伏剧烈甚至略带神经质色彩的女性形象。二零零五年十月，她与刘威联袂主演的电影《爱亦无声》上映，她以细腻的演技诠释了盲女郝梅的内心世界；同年，她还主演了电视剧《用我的生命去爱你》，在剧中饰演一位饱含深情的母亲薛芙蓉，她悉心照料着一对患有重病的双胞胎儿子。二零零八年七月，伍宇娟参与了大型古装电视剧《射雕英雄传》的拍摄，该剧由胡歌、林依晨等当红演员领衔，她在剧中饰演了李萍一角，随着该剧的开播，她的表演也为观众所熟知。二零一二年一月，她与陈思成、佟丽娅、李晨等演员合作，出演的当代都市情感剧《北京爱情故事》正式播出，她在剧中饰演了邵妻。二零一三年，她出演了电影《对不起，我爱你》，饰演了雁夫人这一角色。二零一七年，由丑丑导演执导的电影《侗族大歌》上映，伍宇娟在片中饰演了那福的母亲，以其沉稳的表演展现了角色的温情与坚韧。《无须喝彩》《少年的你》二零二零年十一月，她参演的都市医疗剧《了不起的儿科医生》播出，她在剧中饰演了钟雯丽。二零二一年一月，她出演的聚焦脱贫攻坚主题的电视剧《江山如此多娇》与观众见面，她饰演了顾雪涛；同月，她参演的另一部大型古装电视剧《上阳赋》也相继播出，她在剧中饰演了徐姑姑一角。二零二五年四月二十一日，备受关注的第十六届金扫帚奖公布了由二十八位专业人士组成的评委名单，伍宇娟的名字赫然在列。此外，她在作品《爱亦无声》中饰演了郝梅，在《射雕英雄传》中饰演了李萍，在《江山如此多娇》中饰演了顾雪涛，并在《用我的生命去爱你》中成功塑造了薛芙蓉的形象。
一九八五年一月，伍宇娟正式进入中央戏剧学院，开始了她系统性的表演艺术学习。在大学求学期间，她与同学贾宏声相识并相恋，两人度过了一段美好的校园时光。然而，这段感情后来因贾宏声不幸沾染毒瘾而面临严峻考验，伍宇娟在多次努力与挣扎后，最终无奈选择结束这段关系。此后，她的人生迎来了新的篇章，通过朋友介绍结识了美籍华人李慕华。一九九五年春天，伍宇娟回到家乡湖南耒阳探望父母，李慕华也专程陪同前往，两人的感情在相处中逐渐加深。半年之后，他们选择在北京登记结婚，携手步入婚姻的殿堂。一九九七年八月，伍宇娟诞下儿子，并为他取了一个充满亲昵感的小名“嘛香”。但儿子的降临并未能巩固这段跨国婚姻，在育儿与生活的琐碎中，李慕华与伍宇娟之间逐渐产生了难以弥合的观念差异与情感隔阂。至一九九九年一月，双方经过慎重考虑，最终办理了离婚手续，这段婚姻画上了句号。 时光流转，二零二四年三月二十日，一场以“乡愁”为主题的伍宇娟个人艺术展在北京西城区庄胜广场八号艺术空间隆重开幕，此次展览由青年电影手册主办。展出的作品包括她充满情感张力、直击人心的绘画与装置艺术，给到场观众带来了强烈的视觉与心灵震撼。策展团队从伍宇娟在二零二零年至二零二三年间创作的一百零八幅绘画作品中，精心挑选出五十三件代表性作品进行首次公开展示。尽管从未接受过系统的专业美术训练，伍宇娟却凭借其天马行空的自由想象和饱含生命热情的笔触，成功地构建了一个独属于她个人的、色彩斑斓且情感丰沛的艺术世界，向外界展现了她作为艺术家的另一面才华与深刻的内省思考。
二零零五年十一月十六日，中国红十字基金会在位于北京的福建大厦内正式举行了“天使之恩”专项基金的成立仪式，并同时启动了针对进行性肌营养不良症危困患儿的爱心救助行动。该项“天使之恩”专项基金的主要设立目的，是面向社会各界广泛募集慈善资金，这些资金将严格专款专用，全部投入到对患有进行性肌营养不良症的困境儿童进行医疗救助的工作之中。此举不仅能为受疾病困扰的家庭提供切实的帮助，也进一步推动了旨在保护生命与健康的“红十字天使计划”的深入实施。在当天的活动中，知名演员伍宇娟女士受邀担任了该基金的“爱心天使”，以其公众影响力呼吁更多人关注并支持这一公益事业。
作为一名女演员，伍宇娟始终致力于提升自身的艺术修养，并在艺术道路上不断追求，取得了许多令人瞩目的新成就。在电影《寻枪》中，她虽然饰演的是配角，戏份也并不算多，但其精湛的表演却令人过目难忘，将角色刻画得入木三分，给广大观众留下了极其深刻的印象。仅仅用演员或者画家的身份来定义伍宇娟显然是不全面的，她更是一位善于运用画笔来叙述故事、传递情感的艺术家，通过不同的艺术形式持续表达着自己对世界的观察与感悟。