一九四七年六月十九日，尹汝贞于韩国京畿道开城府出生。在她年仅十岁的时候，家庭遭遇重大变故，父亲因疾病不幸离世。至一九六六年，当时正在读大学一年级的尹汝贞，为了能够通过兼职工作来补贴家用，同时也为了不再向母亲伸手索要学费，她决定报名参加TBC电视台举办的演员招募考试。在当时的考场上，与她一同应考的大部分考生表现平平，然而尹汝贞却展现出与众不同的专注与天赋，她是所有参与者中唯一一位能够将大段大段的剧本台词准确无误背诵出来的人。正是凭借这一突出的表现，她顺利获得了电视台的认可，并由此开启了自己的演艺生涯。
一九七一年，尹汝贞凭借在电影《火女》中的首次亮相，一举斩获了大宗奖与青龙奖等数个韩国重要电影节的最佳女主角桂冠，这一成就于韩国电影史上堪称前所未有。她在片中完美诠释了王妃张禧嫔这一复杂角色，其精湛演技令人叹服。当时，韩剧《张禧嫔》的主角人选由观众投票产生，尹汝贞有幸被选中出演张禧嫔，自此之后她便频繁在历史题材剧集中担当关键人物。通过参演金秀贤作家的电视剧处女作《虹》，尹汝贞开启了与这位著名编剧之间漫长而稳固的合作关系。随后，在金秀贤的成名作品《继母》中，她因成功塑造长女一角而迅速跃升为备受追捧的青春偶像。正当演艺事业如日中天之际，尹汝贞于一九七二年意外地选择了结婚，并随其身为歌手的丈夫移居美国生活。在接下来的十三年里，她褪去明星光环，安心在异国他乡承担起照顾家庭与养育子女的责任。直至一九八四年，尹汝贞毅然决定离婚，独自带着两名儿子返回韩国。这位坚韧的女性就此重启她的表演生涯，从而步入了一段全新的人生与艺术阶段。一九九五年播出的韩剧《澡堂老板家的男人们》标志着尹汝贞真正意义上的成功复出。她拥有极具辨识度的嗓音和率真直爽的性格，表演风格真挚而质朴。早年曾有一位知名导演因其独特的声线而提出质疑，但尹汝贞凭借出众的演技将这一所谓“缺点”转化为个人鲜明的艺术特色。二零零三年，她借由电影《偷情家族》重返大银幕，并获得多项大奖提名，首次回归便赢得了MBC韩国映画放送大奖以及第四届釜纳国际电影节的最佳女配角奖项，此举在韩国国内引起广泛反响，也为她的人生带来了重大转折。二零一零年五月二十一日，尹汝贞出席了在法国举办的第六十三届戛纳电影节，并参加了电影《夏夏夏》的媒体见面会。次年七月，她受邀担任韩国堤川国际音乐电影节竞赛单元的评审委员长。二零一二年，在电影《钱的味道》中，尹汝贞与后辈演员金康宇之间的激情演出片段成为了韩国观众热议的话题。她在片中饰演一位将金钱视为一切、为守护财产不惜付出任何代价的女主人公，而金康宇则扮演她的秘书角色。二零一三年，由罗永锡PD执导的tvN电视台综艺节目《花样爷爷》推出了女演员特辑《花样姐姐》，尹汝贞作为四位参与女演员之一，完成了此次背包旅行节目的拍摄。二零一五年，她为主演的电影《长寿商会》拍摄了一系列宣传写真。二零一六年十月六日，由尹汝贞主演的故事片《酒神小姐》在韩国正式上映。二零一八年一月十七日，她参演的电影《那才是我的世界》与观众见面。二零二零年二月二十一日，其主演的惊悚犯罪题材电影《抓住稻草的野兽》上映。二零二一年，尹汝贞凭借在《米纳里》中的出色表现，于第九十三届奥斯卡颁奖典礼上荣获最佳女配角奖，成为首位获得奥斯卡奖项的韩国演员，同时也是继一九五七年以《樱花恋》获奖的梅木三吉之后，第二位获此殊荣的亚洲女演员。此外，她还在各大国际电影节上累计赢得了包括美国演员工会奖、英国电影学院奖在内的四十二个奖项。同年四月二十九日，她参与的纪录片《尹汝贞 纪录片》在韩国播出。九月，尹汝贞入选《时代周刊》评选的二零二一年度全球百大最具影响力人物榜单。二零二二年三月四日，她为冒险科幻动画电视剧《黑袍纠察队：恶魔》配音的角色Sun-Hee随剧集在美国播出。三月二十五日，其主演的电视剧《弹子球游戏》在美国首播，她在剧中饰演老年善慈，该剧荣获第三十二届哥谭奖最佳长篇突破剧集奖（单集时长超过四十分钟）。三月二十七日，她出席在美国举办的第九十四届奥斯卡颁奖典礼，并为最佳男配角得主特洛伊·科特苏尔颁奖。同年十二月，HOOK娱乐公司宣布，自二零一七年三月起与演员尹汝贞签订的合约正式结束。二零二三年一月，尹汝贞在离开HOOK娱乐公司后，与美国Creative Artists Agency签订了新的合约。二零二四年二月七日，她主演的由金德敏执导、并与柳海真、金允珍等实力派演员共同出演的电影《宠爱》在韩国上映，尹汝贞在片中饰演一位性格冷漠刻薄却对宠物狗“万达”格外温柔的知名建筑师敏瑞。同年八月二十三日，她参演的电视剧《弹子球游戏第二季》播出。二零二五年四月十八日，她出演的电影《喜宴》在北美地区上映，她在剧中饰演Min的祖母。二零二六年四月十六日，她出演的电视剧《怒呛人生第二季》与观众见面。
自1972年结婚直至1984年，尹汝贞在美国度过了十余年光阴。在那段寄居异国的岁月里，她如同一个普通家庭主妇，日复一日地忙于打扫房间、照料孩子，几乎完全脱离了演艺工作。若从她长达三十余年的演员生涯中扣除这段空白期，真正能专注于表演的时间其实相当有限。然而，尽管在这漫长的十三年间，尹汝贞并未亲身参与任何演出，但她内心对表演艺术的关注与深层思考却从未停歇。离婚后，她选择回到韩国，但对于自己是否还能重返舞台，她心中充满了忐忑与忧虑——毕竟离开这个行业实在太久了。由于家庭破裂，尹汝贞不得不为了维持生计而重新接戏，而离婚声明的公开，又使得邀请她出演的导演数量大幅减少。即便偶有剧本找上门，其中安排给她的角色也往往局限于“曾去过美国的女人”或“离婚独身的女性”这类定型化的形象，这让她在复出之初倍感局限。2022年12月5日，尹汝贞正式离开了合作多年的HOOK娱乐公司。直至2025年4月，她在一部名为《喜宴》的电影访谈中，坦然透露了儿子的性取向。她提到，儿子早在2000年就已公开自己的同性恋身份，并在纽约同性婚姻合法化后举行了婚礼。由于此事在韩国尚未能被广泛接受，一直被视为家庭秘密，因此当年只有家人们悄悄前往纽约，默默见证了这场特殊的仪式。
二零二二年九月二十九日，韩国资深演员尹汝贞应邀出席了于首尔中区驻韩美国大使馆官邸举行的一场特别座谈会。此次会议由正在韩国访问的美国副总统卡玛拉·哈里斯主持，旨在与韩国社会各界具有代表性的女性领袖进行面对面的对话与交流。尹汝贞作为韩国文化艺术领域的杰出女性代表之一，参与了这场高层次的国际交流活动，与其他与会者共同就相关议题交换了看法。
“世上唯独的那个声音”，这一评价精准地捕捉了尹汝贞在演艺界独特而不可替代的地位。作为一名至今依然活跃于舞台与银幕的演员，尹汝贞始终保持着从容不迫的堂堂正气，她从不畏惧来自任何同行的挑战与竞争，这份自信与坚韧使她自然而然地成为了广大观众和无数后辈演员心目中备受尊敬与仰望的典范。在公众视野里，人们极少见到尹汝贞刻意摆出某种姿态或营造特定形象，她总是以最本真、最专业的面貌出现。因此，当人们发现年近花甲的她竟优雅地成为了时尚杂志的“封面女郎”时，无不感到惊喜与钦佩。作为一位以深厚演技著称的实力派演员，尹汝贞在度过四十余载辉煌的演艺生涯之际，以杂志模特的崭新身份亮相，这不仅打破了人们对年龄与职业的固有想象，更生动诠释了她艺术生命力的持久与多元。尹汝贞始终以她的方式，不断拓展着表演艺术的边界与可能性。