1922年，于蓝尚在童年时期，便随同父母迁居至黑龙江省哈尔滨市生活。七年后，也就是1929年，她独自一人前往沈阳，投奔在老家的祖父。1931年，“九一八”事变爆发，沈阳很快沦陷于日军铁蹄之下，为躲避战乱，她只得跟随继母一路逃难至河北张家口，并在那里进入高小继续学业。1934年，受当时已在天津河北女师学院求学的姑姑影响，于蓝通过努力考入了该学院的中学部，开始其初中阶段的学习。然而，1937年7月7日卢沟桥事变后，北平被日军占领，华北地区全面陷落，她的学业被迫中断。关于于蓝后来塑造的江姐等经典艺术形象，那都是她人生后续篇章中的重要内容。1938年，她的同窗好友赵书凤的母亲将其原名“于佩文”改为“于蓝”，其中蕴含着“希望你们走在万里无云的蓝天下”的美好寓意；此后，经由同学引荐，并在中共平西抗日根据地负责地方工作的黄秋萍同志帮助下，于蓝与同学赵路一起徒步跋涉，攀越险峻的妙峰山，最终抵达平西抗日根据地的斋堂，正式投身抗日救亡工作；同年10月24日，她历尽艰辛到达革命圣地延安；抵达后，先后进入延安抗日军政大学以及中国女子大学学习深造。1939年，于蓝在抗日军政大学学习期间，光荣地加入了中国共产党。在校期间，她不仅系统学习了政治理论知识，还积极投身于各类业余演出活动，展现出对文艺工作的早期热情。1940年3月，她被调入延安鲁迅艺术文学院实验剧团，正式成为一名专业演员。1941年，她在延安鲁迅艺术文学院参与了苏联作家契诃夫的话剧《求婚》的演出。1943年，她又参演了话剧《挑花篮》；同年11月，她跟随“鲁艺工作团”深入绥德、米脂等地区，为当地军民进行巡回演出。1946年，于蓝所在的东北文艺工作团一团前往大连、旅顺等地开展宣传演出活动；就在这一年，她在曹禺先生的名剧《日出》中成功饰演了女主角陈白露，其表演才华得到进一步展现；随后，她又随团赴丹东等地进行街头宣传；在全团工作总结大会上，因其突出表现，于蓝被评选为模范工作者。1947年，她随东北文工团一团进入长春，并被组织任命为东北电影制片厂第一期训练班的指导员。1948年，她继续跟随东北文工团在佳木斯地区活动。1949年，于蓝在东北电影制片厂开启了她的电影表演艺术生涯，她主演了第一部影片，即描写医务工作者在战火中成长历练的剧情电影《白衣战士》。1950年3月，她转入新成立的北京电影制片厂工作。1951年，她与演员张伐共同主演了剧情电影《翠岗红旗》，在片中生动塑造了在革命低潮时期坚韧等待胜利的红军家属向五儿这一形象。1952年，她与于是之合作，主演了剧情电影《龙须沟》。为了进一步提升表演专业素养，1954年，她考入中央戏剧学院开办的表演干部训练班，进行了为期两年的系统学习，师从苏联专家库里涅夫，深入研习斯坦尼斯拉夫斯基表演体系。1956年，作为训练班毕业演出剧目，她与胡思庆、任德耀合作执导了根据周立波同名长篇小说改编的多幕话剧《暴风骤雨》；同年，从中央戏剧学院表演干部训练班毕业后，她留在中央实验话剧院工作。1959年，她与谢添、马薇联合主演了根据茅盾同名小说改编的剧情电影《林家铺子》，在片中感人至深地诠释了与儿子阿毛相依为命的穷苦张寡妇。1961年，她从中央实验话剧院调回北京电影制片厂；同年，她与孙道临共同主演了剧情电影《革命家庭》，在片中饰演自幼失去双亲、由后娘抚养长大的周莲，她凭借在此片中的精湛演技，荣获第2届莫斯科国际电影节最佳女演员奖。1962年，她荣幸地当选为当时由中国文化部推选出的“新中国22大电影明星”之一。1964年，她响应号召，前往山西绛县南柳大队和曲沃等地参加“四清运动”，与当地农民群众实行“同吃、同住、同劳动”。1965年，她与著名演员赵丹合作主演了剧情电影《烈火中永生》，在片中成功塑造了表面身份为银行高级职员、实为重庆地下党成员的革命者江竹筠（江姐）的光辉形象，这一角色成为其艺术生涯中最具代表性的经典形象之一。在随后的“文化大革命”期间，于蓝与丈夫田方一同受到冲击，被列为北影厂的重点“黑帮”分子，屡次遭受不公正的批斗；之后，她被下放到位于北京郊区大兴县天堂河的北影厂“五七干校”进行劳动改造；后来，她得以返回北京电影制片厂，被安排与田方一同负责编导室的相关工作。1974年，她与王心刚、金征源联合主演了战争题材电影《侦察兵》。1978年，她与李伟远一同前往新疆，并联合执导了儿童题材故事影片《萨里玛珂》，展现出其在导演领域的探索。1981年，她受邀担任第一届中国电影金鸡奖评选委员会委员；5月23日，她在《人民日报》第8版发表了题为《寄语张瑜——写在首届电影“金鸡奖”评选之际》的文章；6月1日，北京儿童电影制片厂（后更名为中国儿童电影制片厂）正式成立，她被任命为首任厂长兼艺术指导；7月3日，她又担任了儿童少年文化艺术协调委员会下设的电影电视协调小组组员。1982年，她在《电影故事》第6期发表了文章《为儿童电影献身》；同年，还在《大众电影》第6期发表了文章《献给孩子们的礼物》。1983年，她所领导的单位获得全国妇联表彰的全国优秀儿童工作单位称号；6月，她当选为第六届全国政协委员；同年，她在《电影画报》上发表了文章《和孩子们相会在新春》。1984年2月5日，她在《天津日报》上发表了文章《明朗的天空》；同年，她以中国电影代表团团长的身份率团参加在意大利举行的第14届季福尼国际儿童青年电影节，该电影节特授予中国儿童电影事业及代表团荣誉奖牌；11月2日，她担任了中国儿童少年电影学会会长一职。1985年4月2日，她在《人民政协报》上发表了文章《电影与儿童——我这一年》；4月，她当选为中国电影家协会副主席；1986年3月25日，她出任中国儿童少年电影电视中心主席；同年，她还获得了中直机关“优秀共产党员”荣誉称号。1987年，她前往印度布班尼斯瓦，参加第5届国际儿童电影节，并担任该电影节的国际评委。1988年，她在《中国电影报》上发表了文章《我只是你们中间的一个》；同年，她赴保加利亚参加第33届国际儿童少年电影电视中心年会及国际儿童电影节，并被推选为该国际组织的理事及执行委员会委员。1989年，她亲自带领儿童电影制片厂的影片专程前往包头，与包头钢铁稀土总公司联合开展儿童少年精神文明共建活动。1991年5月，国际儿童少年影视中心年会在北京召开，于蓝在会上当选为该组织新一届执行委员会成员。1992年，她获得广播电影电视部授予的“劳动模范”称号。1993年，她荣获中国福利会颁发的妇幼事业“樟树奖”。1995年，在纪念世界电影诞生100周年暨中国电影诞生90周年之际，她获得由中国文化部、广电部颁发的“世纪奖”优秀女演员奖；同年，她还获得了中国电影表演艺术学会颁发的“特别奖”。1998年10月，她荣获“中国内藤国际育儿奖”。2001年，时年80岁的于蓝从中国儿童电影制片厂正式退休。2005年，她荣获第10届中国电影表演艺术学会金凤凰奖终身成就奖。2009年，她与张一山、成龙等共同出演了喜剧电影《寻找成龙》；同年，她还与杨利伟、于洋共同主演了儿童电影《锦绣花园》；随后，她获得第10届中国国际儿童电影节颁发的“杰出贡献奖”；此外，她还荣获了第27届中国电影金鸡奖终身成就奖。2018年，她出演了由江平、李作楠联合执导的剧情电影《那些女人》。2019年，她与秦怡、田华等老艺术家联合主演了家庭电影《一切如你》，继续在银幕上绽放光彩。
于蓝的父亲曾任地方法官。1929年，于蓝的母亲去世。
一九四〇年，正值青春年华的十九岁演员于蓝与年长她十岁的同行田方在革命圣地延安携手步入婚姻殿堂，共同开启了他们相濡以沫的人生旅程。婚后数年，他们的家庭迎来了新成员：长子田新新于一九四七年十二月降生，随后在一九五二年四月，次子田壮壮也来到了这个世界，为这个艺术之家增添了更多活力与温馨。然而，幸福的时光并未永远停留，一九七四年八月二十七日，田方因罹患癌症医治无效，于北京不幸逝世，享年六十三岁，他的离去给家人与电影界留下了深切的怀念与无尽的惋惜。
二零二零年六月二十七日晚九时零七分，著名表演艺术家于蓝女士于北京中日友好医院与世长辞，享年九十九岁。这一令人悲恸的消息随后由其子、著名导演田壮壮先生在其个人朋友圈中予以确认。于蓝女士与她的丈夫、同样为中国电影事业做出卓越贡献的表演艺术家田方先生，共同组建了一个充满艺术气息的家庭；他们育有两个儿子，分别是田新新与田壮壮。一张记录了这温馨一家四口——田方、于蓝夫妇及其两位爱子——的珍贵全家福，至今仍留存于人们的记忆与影像资料之中，静静诉说着这个艺术之家的往日温情与点滴岁月。
在艺术创作的道路上，于蓝始终秉持着一种全情投入的信念，无论面对的是主角还是配角，也不论戏份的多少，她都将自己全部的热爱与心力毫无保留地倾注于每一个角色之中。她深深认同生活是艺术创作的根本源泉，难以想象脱离生活根基的人物塑造该如何进行。因此，每当准备一个新角色时，于蓝都会竭力探寻角色存在的内在依据，她不仅广泛研读相关的文字资料，更注重走入真实的生活场景，与角色的原型人物及其亲友深入交往，在琐碎的日常对话与共同经历中建立情感联结。她让自己的情绪跟随人物命运的起伏而剧烈波动，在这样翻江倒海般的情感体验中，逐步深化对人物思想与感情的理解，从而让角色的种子在心中悄然萌芽、生长。在电影《革命家庭》的拍摄过程中，她深入体察周莲错综复杂的心理活动，将这一人物思想上的转变与情感上的层层波澜，清晰而富有层次地呈现于银幕之上。正因为内心体验如此充实饱满，她的表演才显得格外真实自然、质朴无华，深深触动了无数观众的心灵。而在电影《翠岗红旗》里，她对向五儿这一形象的塑造，虽然充分展现了于蓝在表演创作上的才华与潜在能量，但也存在一些可斟酌之处。尽管她注意到了人物在长时间跨度中不同阶段的成长与变化，但对于这些变化之间的内在呼应和逻辑关联把握尚显不足，使得角色在不同层次之间的过渡不够流畅连贯，偶尔会给人以突兀或断裂之感。到了电影《林家铺子》中，于蓝所演绎的张寡妇则成为一个颇为成功的人物形象，这一角色标志着她的电影表演艺术日趋成熟，并初步形成了个人独特的气质——一种质朴纯正、浓淡相宜的艺术风格。纵观于蓝整个电影表演创作生涯，无论是早期略显青涩的作品，还是后期更为精湛的呈现，其间虽有粗拙与精美、稚嫩与成熟的区别，但她的所有表演都贯穿着一个共同的鲜明特点，那便是极少矫揉造作。欣赏于蓝的表演时，观众往往不会立即感受到强烈的情感刺激或刻意煽动，相反，她的艺术魅力是逐渐渗透的，让人在静心品味中慢慢被吸引，继而产生悠长的回味。她在塑造人物时，通常摒弃一切多余和过度的修饰，表面看似平淡寻常，但仔细思量却觉恰到好处，所有应当具备的元素都已蕴含其中，毫无欠缺之感。