早在2003年，年仅十七岁的周毅便凭借出色的专业能力，顺利加入广州芭蕾舞团，正式开启了自己的芭蕾舞演员生涯。在此期间，她参与演出的舞剧《梅兰芳》广受好评，并成功荣获第三届全国舞剧观摩演出所颁发的最佳剧目奖项。到了2004年，周毅继续在芭蕾舞台上展现才华，她出演的另一部重要舞剧《梁山伯与祝英台》同样取得了优异的成绩，该剧在业界颇具影响力的第四届中国舞蹈荷花奖评选中，一举夺得舞剧类铜奖。同样是在这一年，周毅还积极拓展自身发展的多元可能，她报名参加了第十二届美在花城广告新星大赛，凭借在比赛中的稳定发挥和亮眼表现，最终将最佳表演奖收入囊中。 时间来到2006年，周毅在多个领域持续绽放光彩。她先是参加了首届南方小姐选美大赛，在激烈的竞争中，她以优雅的仪态和综合的素养脱颖而出，不仅成功入选大赛十佳选手，还同时荣获最具亲善奖以及最受传媒欢迎奖两项殊荣。同年，周毅的身影也活跃在影视相关的选拔活动中，她参与了由深圳广电集团电视剧频道主办的“我是女主角”选拔活动。在这次活动中，周毅再次凭借其亲切的观众缘和出色的镜头表现力，赢得了观众与评委的广泛认可，最终将最受观众欢迎奖和最上镜奖两项荣誉一并摘下，并由此获任成为深圳电视台电视剧频道的形象代言人，为其个人履历增添了精彩的一笔。
二零零七年，周毅的职业生涯迎来了多个重要起点。她首先在深圳电视台担任了《时尚装苑》等节目的主持人，开启了她在电视荧屏前的旅程。同年，她积极投身于“红楼梦中人”全球选秀活动，经过层层选拔与激烈角逐，最终在宝钗组中脱颖而出，成功跻身全国十强，展现了其不俗的才华与潜力。也是在这一年，周毅正式涉足影视表演领域，与众多艺人合作，出演了个人的首部电视剧作品《真情人生》，完成了从主持人到演员的初步转型。 时间来到二零零九年四月十七日，一部都市家庭剧《穷妈妈富妈妈》与观众见面，周毅在剧中饰演了善良纯真的八十后女孩钟克敏，其自然贴切的表演给观众留下了印象。二零一零年六月二十四日，李少红执导的新版《红楼梦》播出，周毅在剧中诠释了金陵十二钗之一、贞静淡泊的李纨一角，进一步提升了其古装剧领域的认知度。同年，她还参演了一部根据真实历史事件改编的近代传奇剧《杨翠喜案》，在剧中塑造了出身望族却命运多舛的近代新女性形象——四格格，展现了角色复杂的内心世界与时代命运感。此外，周毅还主演了一部现代纯爱题材影片《狠狠爱》，在片中饰演了性格坚强、勇于追求爱情的女主角小米，拓宽了其表演的戏路。在作品《新红楼梦》中，她饰演了李纨（左一）；在《新红楼梦》中，她再次饰演李纨；于《新红楼梦》中，她依然饰演李纨；在《新红楼梦》中，她饰演李纨（左一）；在《新红楼梦》中，她继续饰演李纨；而在《新红楼梦》中，她则饰演了李纨（左二）。
二零一一年五月十三日，其参演的一部民国背景悬疑影片《落难神偷》正式登陆院线，她在片中精彩塑造了风姿绰约、妖娆动人的旧上海女明星周梦雅一角；同月二十二日，另一部都市情感题材电视剧《给你生命给我爱》也与观众见面，她在此剧中饰演了命运曲折却始终保持着乐观与坚韧的女主角路桐。进入二零一二年三月，她参演的现代爱情电影《离不了的婚》播出，片中她化身为深陷情感困扰的女性角色余安安；七月十五日，一部民国言情剧《刺青海娘》登上荧屏，她在剧中扮演了容貌美丽且对挚友重情重义的女子蔡有君；此外，她还主演了一部根据真实事迹改编的公益温情电影《美丽心灵》，在片中生动诠释了那位身体残疾却意志坚定、内心美好的女教师刘云。二零一三年一月十三日，其客串出演的现代家庭剧《我的左手右手》正式播出；同年七月九日，她参演的民国悬疑剧《迷局1927》与观众见面，剧中她饰演了风情万种、妩媚动人但视财如命的富家姨太太刘香菱；十月三十日，另一部现代励志剧《千金归来》播出，她所扮演的赵真真是一个天性善良、却因生活所迫而被人利用的复杂女性形象；十一月三十日，她参演的都市纯爱剧《花开半夏》亮相；十二月五日，民国传奇剧《绞刑架下的春天》播出，她在剧中饰演了命运多舛、红颜薄命的美丽女子窦春宵；同年，她还参演了都市商战剧《酒店世家》，在剧中塑造了为爱情甘愿默默付出、不求名分的痴情女子顾莉雅。二零一四年二月八日，她参演的近代革命题材剧集《代号麻雀》播出，剧中她挑战了美艳动人且心机深沉的日本女间谍春花一角；五月四日，另一部都市言情剧《如果我爱你》也与观众见面。二零一五年八月二十三日，其参演的抗战动作剧《刀光枪影》（原名《大道天行》）正式播出，她在剧中饰演了身段妙曼、嗓音迷人，活跃于上海滩的名媛满优。相关角色海报亦同步释出。
二零一六年十一月七日，由她参与演出的电视剧《咱们相爱吧》正式与观众见面；随后在同年十一月十一日，她又在一部古装宫廷传奇剧《锦绣未央》中亮相，并成功塑造了春茗这一角色——一位心机深沉、手段狠辣且屡施诡计的腹黑丫鬟形象。时间来到二零一八年一月一日，她再次出现在一部年代背景的悬疑剧集《茧镇奇缘》之中，为剧集增添了独特的演绎色彩。此后，她还陆续参与了《茧镇奇缘》、《茧镇奇缘》以及《茧镇奇缘》（中）等多部作品的演出。进入二零二零年三月十九日，她参演的一部融合古装、爱情与玄幻元素的剧集《三千鸦杀》如期播出；直至二零二二年四月十六日，她又在一部古装爱情题材的剧集《祝卿好》中登场，饰演了剧中人物陆芊，进一步展现了其在古装剧领域的多样表现力。
随着新版《红楼梦》的播出，观众们逐渐熟悉并喜爱上了剧中十二金钗之一李纨的扮演者周毅。她以温婉大方的表演风格，不仅赢得了众多专家与学者的高度评价，更获得了导演李少红的认可，称她是全剧中最贴近原著人物神韵的演员之一。自幼便接受系统芭蕾舞训练的周毅，曾凭借在多部芭蕾舞剧中的精湛演绎而被观众亲切地誉为“芭蕾公主”。在人们的普遍印象里，她总是带着一种娴静典雅的气质，而在一系列个人时尚写真中，身着简约白色短裙的她，则淋漓尽致地展现出自身清新恬淡、美丽优雅的独特魅力。正是通过在李少红版《红楼梦》中成功塑造“李纨”这一角色，周毅脱颖而出，其温婉端庄、大气从容的少奶奶形象也因此深深烙印在观众心中。此后，在苦情题材剧集《给你生命给我爱》中，她实现了形象的彻底转变，化身为命运坎坷却坚韧不拔的励志女孩“路桐”。尽管这一角色的性格与处境与周毅本人的现实生活状态存在显著差异，但她依然依靠对人物的细致揣摩和自然真挚的演技，将角色刻画得入木三分，赢得了广泛的共鸣与赞赏。